文庫(kù)制備過程中最重要的 QC 步驟之一發(fā)生在 NGS 工作流程開始之前。這一關(guān)鍵 QC 步驟就是分析要使用的起始材料，無(wú)論是 DNA 還是 RNA。確保高質(zhì)量的起始材料是制備高質(zhì)量文庫(kù)并獲得成功測(cè)序結(jié)果的第一步。大多數(shù) NGS 文庫(kù)制備試劑盒建議使用特定的起始濃度和起始量，以獲得最佳測(cè)序結(jié)果。如果起始材料降解或質(zhì)量較差，可能會(huì)難以甚至無(wú)法利用樣品創(chuàng)建文庫(kù)。一些研究考察了樣品質(zhì)量和下游分析之間的相關(guān)性。

整個(gè) NGS 文庫(kù)制備過程的質(zhì)量控制

確定了用于 NGS 文庫(kù)制備的合適樣品后，需采取多個(gè)步驟將其轉(zhuǎn)變?yōu)橛糜跍y(cè)序的合適文庫(kù)。為了獲得良好可靠的測(cè)序數(shù)據(jù)，強(qiáng)烈建議在工作流程中多個(gè)環(huán)節(jié)設(shè)置 QC 檢查點(diǎn)，以確保創(chuàng)建高質(zhì)量文庫(kù)。檢查點(diǎn)中包括片段化和接頭連接后的樣品 QC。